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關(guān)于自動(dòng)進(jìn)樣器在HPLC分析中的應(yīng)用

更新時(shí)間:2017-03-27 瀏覽次數(shù):[2216]
自動(dòng)進(jìn)樣器在生化分析儀器,色譜分析儀器中有著廣泛應(yīng)用,它的運(yùn)行可靠性和性直接影響著分析結(jié)果。液相色譜系統(tǒng)大多使用自動(dòng)進(jìn)樣器引入樣品,正確使用自動(dòng)進(jìn)樣器是保證液相色譜系統(tǒng)分離度的基本條件,用自動(dòng)進(jìn)樣器注入適當(dāng)體積的標(biāo)準(zhǔn)樣品可為峰高和峰面積的測(cè)量提供小于1%的標(biāo)準(zhǔn)偏差。  
對(duì)于液相色譜而言,無(wú)論是手動(dòng)進(jìn)樣器或是自動(dòng)進(jìn)樣器都是用六通閥進(jìn)樣的,只是自動(dòng)進(jìn)樣的較手動(dòng)進(jìn)樣器的死體積較大,多了計(jì)量泵和一部分聯(lián)接管線(xiàn)。自動(dòng)進(jìn)樣器可以減少體力勞動(dòng),增加樣品處理量,提高日常工作精度。  
現(xiàn)在的色譜實(shí)驗(yàn)室,大都使用六通進(jìn)樣閥或自動(dòng)進(jìn)樣器。進(jìn)樣裝置要求:密封性好,死體積小,重復(fù)性好,保證中心進(jìn)樣,進(jìn)樣時(shí)對(duì)色譜系統(tǒng)的壓力、流量影響小。HPLC分析進(jìn)樣方式可分為:隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣、自動(dòng)進(jìn)樣。  
1.隔膜進(jìn)樣。  
用微量注射器將樣品注入專(zhuān)門(mén)設(shè)計(jì)的與色譜柱相連的進(jìn)樣頭內(nèi),可把樣品直接送到柱頭填充床的中心,死體積幾乎等于零,可以獲得*的柱效,且價(jià)格便宜,操作方便。但不能在高壓下使用(如10MPA以上);此外隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應(yīng),使進(jìn)樣重復(fù)性只能達(dá)到1~2%;加之能碉各種溶劑的橡皮不易找到,常規(guī)分析使用受到限制。  
2.停流進(jìn)樣。  
可避免在高壓下進(jìn)樣。但在HPLC中由于隔膜的污染,停泵或重新啟動(dòng)時(shí)往往會(huì)出現(xiàn)“鬼峰”;另一缺點(diǎn)是保留時(shí)間不準(zhǔn)。在以峰的始末信號(hào)控制餾分收集的制備色譜中,效果較好。  
3.閥進(jìn)樣。  
一般HPLC分析常用自動(dòng)進(jìn)樣器六通進(jìn)樣閥,其關(guān)鍵部件由圓形密封墊子(轉(zhuǎn)子)和固定底座(定子)組成。由于閥接頭和連接管死體積在存在,柱效率低于隔膜進(jìn)樣(約下降5~10%左右),但耐高壓(35~40MPA),進(jìn)樣量準(zhǔn)確,重復(fù)性好(0.5%),操作方便。

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